C18 色譜柱是液相色譜中常用的一種固定相，下面是使用 C18 色譜柱的一些基本步驟：
1. 色譜柱的準備：在使用前，需要對色譜柱進行清洗和平衡。通常，可以使用色譜柱廠商推薦的溶劑或流動相進行清洗，并在清洗后使用流動相平衡色譜柱。平衡時間通常為 1-2 小時，直到基線穩定為止。
2. 流動相的選擇：C18 色譜柱的分離效果主要取決于流動相的組成和比例。通常，流動相包括有機溶劑和水，可以根據樣品的性質和分離需求選擇合適的流動相。對于普通的反相色譜，常用的流動相組合包括甲醇-水、乙腈-水等。
3. 樣品的準備：樣品需要經過適當的預處理，使其能夠在流動相中溶解，并去除可能對色譜柱造成污染的物質。對于含有機溶劑的樣品，需要使用低濃度的有機溶劑進行稀釋，以避免對色譜柱造成損壞。
4. 進樣：將樣品注入色譜柱，開始分離過程。進樣量需要根據樣品的濃度和分離需求進行調整，通常為幾微升到幾十微升。
5. 洗脫：樣品進入色譜柱后，通過控制流動相的流速和比例，使樣品在色譜柱中進行分離。不同的化合物在色譜柱中的保留時間不同，因此可以通過監測色譜峰的出現和消失來判斷樣品中不同化合物的存在。
6. 色譜柱的清洗和保養：在使用后，需要對色譜柱進行清洗和保養，以延長其壽命和保持其分離性能。通常，可以使用與清洗色譜柱相同的溶劑或流動相進行清洗，并在清洗后使用流動相平衡色譜柱。此外，還需要避免長時間停留在高壓狀態下，避免使用可能對色譜柱造成損壞的物質，如強酸、強堿等。
總之，C18 色譜柱是液相色譜中常用的一種固定相，使用前需要進行清洗和平衡，使用時需要選擇合適的流動相和樣品，并進行適當的預處理和進樣，使用后需要進行清洗和保養。在使用過程中，需要注意色譜柱的壓力和流量，
發布于: 2023-08-28